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酶標儀與分光光度計的區(qū)別
發(fā)布日期:2022/11/15 9:12:24
酶標儀分光光度計都是實驗室常用的分析測量工具,它們的測定原理是相同的,,都是使用朗伯-比耳定律,,測定的都是樣本的吸光度。
一,、酶標儀和分光光度計的三大差別

酶標儀即酶聯免*疫檢測儀,。是酶聯免*疫吸附試驗的儀器又稱微孔板檢測器??珊唵蔚胤譃榘胱詣雍腿詣?大類,,但其工作原理基本上都是一致的,其核心都是一個比色計,即用比色法來進行分析,。測定一般要求測試液的終體積在250μL以下,,用一般光電比色計無法完成測試,因此對酶標儀中的光電比色計有特殊要求,。

分光光度計,,又稱光譜,,是將成分復雜的光分解為光譜線的科學儀器。測量范圍一般包括波長范圍為380~780 nm的可見光區(qū)和波長范圍為200~380 nm的紫外光區(qū),。不同的光源都有其特有的發(fā)射光譜,因此可采用不同的發(fā)光體作為儀器的光源,。
同為,實驗室內測定吸光度的儀器,,酶標儀和分光光度計存在一些不同之處,,具體差別體現在以下三個方面:
 (1)盛裝待測溶液的容器:
分光光度計用的是比色皿,酶標儀使用的是塑料微孔板(酶標板),。比色皿只能起到盛裝溶液的作用,,每個比色皿一次只能盛裝一種溶液。酶標板常用透明的聚乙烯材料制成,,對抗原抗體有較強的吸附作用,,因此用它作為固相載體,酶標板通常為48孔或96孔,,每個微孔可以盛裝不同的溶液,。
 (2)光路的方向:
分光光度計是水平光路,而酶標儀則是垂直光路,。由于酶標板盛樣本的塑料微孔板是多排多孔的,光線只能垂直穿過,因此酶標儀的光束都是垂直通過待測溶液和微孔板的,光束既可是從上到下,也可以是從下到上穿過比色液,。垂直光的特點是標本吸光度受液體濃縮或稀釋的影響小,不足之處是受被測樣本液面是否水平,、酶標板透光性,、孔底是否平整等的影響較大。
 (3)光路的長度:
由于光密度(OD值)與吸光系數, 待測組分的濃度以及光路長度成正比關系,。
分光光度計采用的比色杯的寬度通常是1cm,,所以光路長度固定為1cm。因此不同儀器,,不同批次測量的數據具有同樣的可比性,。
而酶標儀采用的是垂直光路, 所以光路的長度應該是液體液面的高度,。所以測得的值受到樣品的體積的影響,。
 二、酶標儀和分光光度計的優(yōu)缺點比較
分光光度計:
優(yōu)點:1,、檢測波長范圍較寬,;2、加樣量不一致對測量結果沒有影響,。
缺點:1,、工作量大,操作繁瑣,,耗時,;2,、耗試劑;3,、結果穩(wěn)定性差,,重復性較差,誤差較大,;4,、對于微量物質,難以檢測到,。
主要應用領域:藥品檢驗,、藥*物分析、環(huán)境檢測,、衛(wèi)生防疫食品,、化工、科研等領域對物質進行定性,、定量分析,。
 酶標儀:
優(yōu)點:1、一次性處理樣品量大,,省時,;2、樣本,、試劑用量少,;3、操作簡單,,重復性好,,檢測速度快、效率高,。
缺點:1,、酶標儀96孔板在紫外光區(qū)有較強的紫外吸收,應盡量避免在300nm以下使用酶標儀進行含量測定,;2,、必須確保微孔板每個孔加樣量嚴格一致,對實驗者的操作技能提出了更高的要求,。

主要應用領域:臨床檢驗,、生物學研究、農業(yè)科學,、食品和環(huán)境科學等,。

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